Comment préparer un milieu de poudre sèche en liquide ?

La méthode de préparation du milieu poudreux sec en liquide est à peu près la même et les étapes générales sont les suivantes :

Préparer le matériel :

 Assurez-vous d'avoir suffisamment d'eau pure de qualité culture cellulaire ou injectable, ainsi que les additifs requis tels qu'une solution de bicarbonate de sodium à 7,5 %, une solution de L-glutamine 200 mM, une solution d'acide chlorhydrique 1N et une solution d'hydroxyde de sodium 1N.

Poudre sèche dissoute :

Versez le milieu poudre sec dans un récipient.

Utilisez une quantité appropriée d’eau (généralement de l’eau pure de qualité culture cellulaire ou de qualité injection) pour dissoudre complètement la poudre sèche.

Assurez-vous que la quantité totale d’eau représente les 2/3 de la quantité totale de milieu liquide requise.

Ajuster la valeur du pH :

Utilisez un pH-mètre ou une bandelette de test de précision pH pour ajuster le pH du milieu au niveau souhaité, généralement 7,2-7,4.

Ajouter des additifs :

Selon les instructions du produit et les exigences expérimentales, ajoutez la quantité appropriée de bicarbonate de sodium, de L-glutamine et d'autres additifs.

Filtration pour éliminer les bactéries :

La membrane filtrante microporeuse de 0,22 um a été utilisée pour filtrer et éliminer les bactéries afin de garantir la stérilité du milieu.

Sauvegarder:

Le milieu liquide préparé a été conservé à l’abri de la lumière entre 2℃ et 8℃.

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Veuillez noter:

1. La proportion spécifique et les étapes de préparation peuvent varier selon les différentes marques et types de supports en poudre sèche, c'est pourquoi les instructions sur le sac d'emballage du support doivent être lues attentivement avant utilisation.

2. Un test stérile doit être effectué après la préparation du milieu de culture pour détecter s'il y a une contamination dans le milieu de culture.

3. La quantité de liquide préparée dans chaque lot doit être utilisée pendant environ 2 semaines, afin d'éviter la perte de nutriments causée par une période trop longue.